前言
Dr.Cell实验室在检测外泌体NTA，提供NTA鉴定报告时，经常会被问到：你们可以提供文献中的粒径浓度分布图么？文献中的粒径浓度分布图怎么做的？……
今天就和小希一起来Get新技能，学习怎么用Origin软件绘制出文献中NTA粒径浓度分布图！
获得数据
Dr.Cell实验室检测外泌体NTA会提供完整的数据，每个样本每检测一次，将得到以下5个文件（每个送检外泌体样本Dr.Cell实验室将至少重复检测3次，因此一个检测样本会有3组NTA如下数据）。
① 视频文档：记录颗粒的布朗运动状态
② 检测报告：PDF文档（详情请查阅：NTA报告解读说明）
③ 原始数据：记录检测过程中仪器的温度、电导率等参数，以及颗粒粒径与数量原始数据
④ 检测说明：记录检测样本池11个位点的检测情况
⑤ 原始文件：FCS文件，可通过ZetaView软件、流式Flowjo软件打开
制图
我们将用文档③中原始数据进行作图。
*注意.
文档③中原始数据包含线性检测数据与对数检测数据！
两组数据之间是 “-1.000000、-1.000000、-1.000000、 -1.000000”隔开！
常规取线性数据作图，即选择
“Size Distribution”至 “-1.000000、-1.000000、-1.000000、 -1.000000” 之间的数据！
也可直接宣传粒径至1000nm的数据作图。
▲ 粒径、浓度数据
▲ 线性数据-对数数据
直接将数据复制至Origin软件工作表中
（例：选取至粒径1000nm的颗粒数据）
Origin 软件打开如下图：
▲ Origin
将“Size / nm Number Particles / mL E+6 Volume / nm^3” 复制至Origin 软件“Long Name”行， C列中“E+6”无意义，直接去掉。
将粒径浓度数据（例：选取粒径2.5nm至粒径1002nm的颗粒数据）复制至A1单元格开始。
▲ C列中“E+6”无意义，直接去掉。
选中A列（粒径）与C列（颗粒浓度），点击工具栏中“Plot→Line→Line”，得到粒径浓度图。
▲ 选取原始数据中1,3列数据
▲ 粒径浓度分布图
调整坐标
调整纵坐标，双击纵坐标，弹出“Y Axis”框，“Display”选择“Scientific：1E3”
▲ 纵坐标调整
点击“Scale”,“From”选项可以调从“0”开始，也可以不调整，此例调整为“0”。
“To” 选项调整Y轴最大值，使得峰值位于图中的上1/3处。
“Increment”调整纵坐标单位刻度，单位刻度为“100000”。
▲ 纵坐标调整
调整后如下图：
依次调整横坐标，双击横坐标刻度数值后，点击“Scale”,“From”选项可以调从“0”开始，也可以不调整。
“To”选项可以调成“600-1000”，“Increment”调整纵坐标单位刻度，此例中调整为“100”。
▲ 横坐标调整
调整后如下图：
▲ 坐标调整图
平滑处理
接下来，平滑处理，点击“Analysis”→“Signal Processing” →“Smooth” →“Open Dialog” 即弹出对话框。
下一次平滑处理时可直接点击“Analysis”→“1 Smooth” 即弹出对话框。
▲ 平滑处理
▲ 平滑处理
弹出框“Output”选项选择“XY = input XY”, 即在原图上直接调整。调整后如下图：
其中“Points of Window”是调整平滑度的，一般可以不用调整，数字越大越失真。
▲ 平滑处理图
双击峰图跳出“Plot Details”可调整峰图颜色、线条、宽度等。
▲ 峰图调整
完成，调整后如下图。
▲ 最终粒径浓度分布图
原液粒径浓度分布图
如需要得到原液的粒径浓度分布图，将“Particle/mL ”数据乘以稀释倍数，即得到原液浓度结果。
稀释倍数见文档中“Dilution”，或者PDF报告右上角“Dilution Factor:”
▲ PDF报告-稀释倍数
同样可以对比分析多个样本的粒径浓度分布结果，得到组合图。
▲ 文献中的粒径浓度分布图 (ref.1)
完整的操作视频：
此次采用的是Origin软件：OriginLab OriginPro 8.5。
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