酿酒酵母细胞应用及其残留DNA质控

酿酒酵母作为单细胞低等真核生物，具有易培养、繁殖快、便于基因操作等优点，渐渐被开发作为外源基因表达系统。酿酒酵母是一种与人类生活密切相关的酵母，很早以前人们就开始利用它进行酒的酿造和发酵面包。作为真核生物的模式菌，酿酒酵母是目前了解最完全的真核生物，其全序列的测定已于1996年完成。

在酿酒酵母中表达了人a-干扰素，开始将酿酒酵母表达系统推向了应用开发。此后很多具有应用价值的基因在酿酒酵母表达系统中得到成功表达，如乙肝表面抗原和核心抗原、粉蛋白酶、凝乳蛋白酶及许多细胞因子。此外，酿酒酵母还可用于胰岛素和胰高血糖素等的工业化生产，也可用来制备亚单位疫苗（如HBV疫苗、口蹄疫疫苗等）。

残留DNA风险及法规监管要求

尽管在酿酒酵母在生产过程中已有残留DNA的去除工艺，但终产品中仍有可能残留宿主DNA及其片段。所以酿酒酵母检测项目是生物制品生产工艺中重要的质量检测指标之一。在此情况下，建立合适的检测方法监测生产工艺，控制酿酒酵母残留核酸限度，以确保产品的安全性和质量已经成为监管机构和行业内关注的重点。

§ 

《中国药典》2020年版三部规定，以细胞基质生产的生物制剂外源宿主细胞DNA残留量不能超过100pg/剂，以细菌或真菌基质（酵母、大肠杆菌等）表达的生物制品中DNA残留量不超过10ng/剂。

§ 

§ 

《欧洲药典》（EP10.0）通则规定的生物制品残留DNA限度大多为不超过10ng/剂。

§ 

§ 

美国食品药品监督管理局（FDA）发布的指导原则中指出生物制品宿主细胞DNA残留限度不得超过100pg/剂，对于大剂量的生物制品（如单克隆抗体），根据其残留DNA来源及给药途径，DNA残留量可放宽至10ng/剂。

§ 

残留DNA检测方法

《中华人民共和国药典》2020年版第三部规定，外源性DNA残留检测采用DNA探针杂交法、荧光染色法和定量PCR法。目前市场上对宿主细胞残留DNA检测，主要采用荧光探针qPCR方法，qPCR法具有极高的灵敏度、序列特异性和准确性，可为生物制药工业在工艺研究和成品质量控制方面提供可靠的检测手段，现也已成为各生物制品厂家首选检测方法。

翌圣生物依托相关法规，从市场需求出发，自主研发了酿酒酵母宿主细胞DNA残留检测试剂盒。该试剂盒可快速准确定量检测各种生物制品及药品的中间品、半成品和成品中毕赤酵母残留DNA残留量。还研发了与酿酒酵母残留DNA检测试剂盒配套使用的宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒，以及配套的自动化核酸提取仪器。

// 

产品资质

· 

符合法规：按照EP2.6.7、JP G3和USP 63药典要求验证，符合国际权威机构的标准；

· 

配合审计：产品生产符合ISO13485质量体系标准，有完善的审计文件；

保障品质：试剂盒所需酶原料全自产，且已产业化，供货稳定；

· 

技术经验积累：TaqMan法有技术沉淀，使得Kit灵敏度高；

· 

专注产品性能：Taq酶抗体库，双封闭抗体提高了Kit特异性、稳定性等。

· 

// 

产品特点

· 

抗干扰性：针对复杂基质，样本加标回收率至少能达到70-130%；

灵敏度高：定量下限(LLOQ)分别为3fg/μL，检测下限(LLOD)分别为0.3fg/μL；

精密度高：批内重复性高CV＜10%，批间差异小即中间精密度CV＜15%；

专属性强：特异性检测酿酒酵母残留DNA，不受其他外源基因组DNA干扰；

防干扰强：引入内部质控(IC)，可排除样本干扰、反应配制异常等因素，有效避免假阴性。

验证完善：参考ICH Q2（R2）分析方法验证指导原则，可提供完善的验证报告。

· 

产品信息