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如何高效对细胞进行siRNA和miRNA转染?

作者:上海魔兜儿生物科技有限公司 2025-03-07T00:00 (访问量:1436)

siRNA和miRNA是研究基因功能的强大工具。siRNA,是一类人工合成的双链RNA分子,长度通常在19-23个核苷酸之间,通过特异性结合并降解细胞内的目标mRNA,实现基因沉默,从而抑制特定基因的表达。miRNA,即microRNA,是一类机体内源产生的的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,能够通过与mRNA的3'非翻译区(3'UTR)部分互补结合对基因表达进行调控。

siRNA和miRNA转染技术在基因功能研究、疾病机制探索、药物靶点发现等方面具有重要意义。然而,在实际操作中,由于细胞毒性、转染体系等问题,常常使得这两种RNA的转染并不能如愿进行。那么如何让转染能够更顺利地进行呢?今天我们就一起来看看有哪些可以提升转染效率的措施吧!
 

1.保证高纯度的siRNA或者miRNA

确保siRNA是经过PAGE纯化和脱盐处理过的,高纯度的siRNA或者miRNA有助于获得较高的转染效率。
 

2.保证细胞状态

细胞状态对于转染结果至关重要。通常,细胞密度达到70%-80%才可以进行转染,且要保证细胞代数较短,生长活力较好,从而避免产生较大的细胞毒性。
 

3.避免RNA降解

整个实验过程使用无RNA酶和无热原性的材料,如离心管、枪头、缓冲液等。
 

4.预实验进行转染试剂与RNA比例的摸索

不同细胞系对于转染试剂的耐受度不一样,适宜的RNA浓度也不一样,需要预实验进行梯度实验摸索,才能在正式实验时保证较高的转染效率。
 

5.保证无血清或者低血清培养环境

尝试使用无血清或低血清培养基,避免转染试剂和RNA的结合受到干扰影响转染效果。
 

6.选择合适的转染试剂

不同细胞的敏感度不同,适宜的转染试剂也有差异,可根据文献或者个人经验选择合适的试剂进行转染。

Celthy siRNA/miRNA体外转染试剂
是Arcegen推出的一款专门针对siRNA和miRNA转染的转染试剂,可在广泛的细胞系中产生超高转染效率,适用于siRNA/miRNA相关的基因研究。从源头上解决转染效率低的难题,帮您规避一切可控风险!

本产品具有如下特点

超高转染效率:凭借优化的配方和转染机制,能够出色地将siRNA和miRNA导入细胞,可实现1 nM的siRNA超过90%的表达效率,避免了脱靶效应。

极低细胞毒性:通过精心的设计和严格的筛选,尽可能减少对细胞的损伤,维持细胞的正常生理功能以及细胞内环境的稳定,提高实验结果的可靠性。

广泛细胞适用性:经过广泛的测试和验证,本产品适用于多种细胞转染,包括Hela、MCF-7、HepG2、CHO等贴壁细胞;对于难以转染的悬浮细胞系(如:K562或THP-1细胞),部分原代细胞(如:原代人成纤维细胞、原代人肝细胞等),均可达到80%的沉默效率。

测试数据:


图 Celthy siRNA/miRNA体外转染试剂与竞品T转染沉默效率比较

产品信息

产品名称 产品货号
Celthy siRNA/miRNA In vitro transfection reagent
Celthy siRNA/miRNA体外转染试剂
C130004



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